微流控擴散測量儀

微流控擴散測量儀(yi) Fluidity One-M 是一款用於(yu) 綜合分析蛋白質相互作用以及蛋白質性質的儀(yi) 器，它采用微流控擴散測量技術（Microfluidic Diffusional Sizing, MDS），可在溶液中一次性測量分子大小、結合親(qin) 和力（KD）、濃度和化學計量比。

微流控擴散測量儀(yi) 產(chan) 品特點：

• 多參數測量：Fluidity One-M 可以同時測量蛋白質的親(qin) 和力、大小、濃度和化學計量比，為(wei) 研究者提供全麵的蛋白質相互作用數據。

• 廣泛的樣品兼容性：可分析不同緩衝(chong) 係統中的樣品，包括細胞裂解液、血清和唾液等多種生理相關(guan) 條件下的樣本。

• 快速高效：僅(jin) 需25分鍾即可測定24個(ge) 數據點的KD值，樣品消耗量少，每個(ge) 數據點僅(jin) 需4 µL，總共50-80 µL即可完成一次KD測定。

• 微流體(ti) 擴散測量（MDS）：利用熒光標記的蛋白質在微流體(ti) 擴散室中的擴散行為(wei) 來測定分子的大小。當標記的蛋白與(yu) 結合夥(huo) 伴相互作用時，測定到的複合物大小會(hui) 隨之變化，從(cong) 而進行相互作用分析。

應用領域：

• 基礎研究與(yu) 藥物開發：用於(yu) 研究複雜靶標（如膜蛋白、多蛋白複合物或本質無序蛋白質）的相互作用，甚至可以直接分析粗細胞裂解液、未稀釋血清或血漿中的樣本。

• 藥物篩選與(yu) 優(you) 化：可以在無需純化的情況下，驗證和表征不同靶點的相互作用，並深入了解藥物作用機製。

• 過程開發與(yu) 質量控製：在藥物開發過程中，幫助跟蹤蛋白質在優(you) 化、純化和製劑開發中的活性變化，並監測蛋白質的粘度和聚集狀態。

• 轉化和臨(lin) 床研究：幫助測量血清中抗體(ti) 的濃度和親(qin) 和力，並進行藥代動力學和血清穩定性研究。

技術優(you) 勢：

• 無標記直接測量：無需預先校準或生物物理學知識，即可直接測量蛋白質的大小變化，提供定量且易於(yu) 解釋的數據。

• 高靈敏度與(yu) 特異性：利用熒光檢測技術，可在天然環境（如血清和細胞裂解液）中對蛋白質相互作用進行高特異性分析。

• 無維護設計：儀(yi) 器采用流體(ti) 無損設計，操作簡單，且觸屏控製方便，無需頻繁維護。

• 雲(yun) 端分析：Fluidity Insight 提供雲(yun) 端實驗優(you) 化、先進算法分析和跨實驗數據集的分析與(yu) 可視化，幫助研究者更好地理解數據。

技術規格：

• 測量範圍：分子水動力半徑（Rh）為(wei) 1 – 20 nm，分子量範圍為(wei) 1.4 kDa – 14 MDa。

• 靈敏度：對於(yu) 標記的HSA在PBS中的濃度範圍，Alexa Fluor 488為(wei) 1 nM – 3 μM，Alexa Fluor 647為(wei) 100 pM – 3 μM。

• 兼容性：兼容多種緩衝(chong) 液和生物緩衝(chong) 係統，包括TRIS、HEPES、PBS、NaCl、KCl、TWEEN、DMSO和DMF等。

應用案例：

Fluidity One-M 讓蛋白質相互作用的分析變得簡單高效，為(wei) 科研工作者提供了一款可靠、便捷且靈活的實驗工具，可用於(yu) 廣泛的生物學和藥物開發領域。

1. 蛋白質相互作用的結合親(qin) 和力(KD)以及流體(ti) 動力學半徑(Rh)

Fluidity One-W利用微流控擴散測量(MDS)，可以計算出蛋白質相互作用的結合親(qin) 和力(KD)以及流體(ti) 動力學半徑(Rh)。

在該圖中，絲(si) 氨酸蛋白酶凝血酶與(yu) 兩(liang) 個(ge) 預先標記的抗凝血酶配體(ti) HD22和TBA進行了滴定。每個(ge) 配體(ti) 與(yu) 凝血酶的不同表位相結合；這些相互作用先前已經被很好地描述過了。每個(ge) 配體(ti) -蛋白質複合物的結合親(qin) 和力，以及複合物和配體(ti) 的流體(ti) 動力學半徑，都符合之前研究報告得到的數值。

2. 天然生物溶液中的蛋白質相互作用

Fluidity One-W可以研究蛋白質在天然生物溶液中的相互作用，節省純化的時間，也可以在天然條件下研究更困難的相互作用。該圖比較了在0.05% 吐溫 20 (PBS-T)磷酸鹽緩衝(chong) 液和FreeStyle™293培養(yang) 基中，A蛋白 (SpA)與(yu) 免疫球蛋白G (IgG)抗體(ti) 的相互作用。結果表明，在兩(liang) 種溶液中的結合親(qin) 和力和流體(ti) 動力學半徑均無顯著差異。

3. 複合物化學計量學的計算

蛋白質複合物化學計量學的研究是充分理解細胞通路的關(guan) 鍵；從(cong) 基礎的生物學過程，到疾病病理和藥物的作用。在計算結合親(qin) 和力(KD)的過程中，Fluidity One-W測量了未結合的標記物和複合物的流體(ti) 動力學半徑(Rh)。流體(ti) 動力學半徑可以用來推斷蛋白質複合物的化學計量學和溶液中整體(ti) 的結合比例與(yu) 結構。下圖的模型模擬了以1:1、1:2和1:3的比例結合的SpA-IgG複合物。紅色帶狀物代表SpA，藍色帶狀物代表IgG。利用這些模型計算了三種比例結合物的Rh假設值(紅色條形)。Fluidity One-W在100nM濃度下進行3次檢測，將測得的Rh平均值(藍色條形)與(yu) 這些假設值做比較。紅色條形上添加了Rh預測值的10%作為(wei) 誤差範圍，以表示模型中的最小不確定性。Fluidity One-W通過微流控擴散測量的Rh值與(yu) 1:3結合比例的SpA-IgG複合物的Rh假設值相符。對於(yu) 折疊或延伸的蛋白質，Rh和分子量有各自的換算公式。研究化學計量學的同時，也可以分析蛋白質的結構和分子量。

技術優(you) 勢：